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Immunocromatografia a Flusso Laterale
Un test immunocromatografico a flusso laterale ( Lateral Flow Test ) è un’indagine basata sulla classica reazione antigene-anticorpo su supporto solido. Il test utilizza dei letti capillari formati da strisce di polimeri particolari (per esempio membrane di nitrocellulosa), dotati della capacità di trasporto capillare di fluidi, situati su un dispositivo in plastica; il tutto prende il nome di card .
Sul card abbiamo la presenza di tre zone (vedi immagine): Zona campione, Zona coniugato e Zona lettura.
Nella zona campione , viene deposto il materiale biologico in cui vogliamo verificare la presenza o l’assenza di una determinata sostanza che fungerà da antigene. Il campione migrerà per capillarità verso la zona coniugato dove è presente l’anticorpo specifico contro la sostanza in esame, coniugato con oro colloidale; per cui in caso di presenza di tale sostanza si formerà un immunocomplesso ( sostanza in esame/anticorpi specifici marcati ).
La migrazione continuerà infine verso la zona di lettura dove sono fissati in due punti diversi, gli anticorpi specifici verso la sostanza in esame ( zona test ) e gli anti-anticorpi ( zona controllo ).
Nella zona lettura la reazione antigene-anticorpo produrrà la formazione di una banda colorata in rosso grazie alla presenza di oro colloidale.
In caso di negatività (assenza della sostanza in esame) si formerà una sola banda colorata nella zona controllo in quanto si avrà una sola reazione fra anticorpi coniugati e anti-anticorpi adesi al supporto: questo indica che la reazione immunocromatografica è avvenuta correttamente.
In caso di positività (presenza della sostanza nel campione) avremo invece due bande colorate in rosso poiché la reazione avverrà non solo a livello degli anti-anticorpi (controllo) ma anche con gli anticorpi anti-sostanza in esame (zona test).
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